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現代高效液相色譜柱特征
發布時間:2013/1/8 9:48:58 瀏覽次數:4053次 來源:英諾生物



現代高效液相色譜柱特征


高效液相色譜柱


        早在20 世紀初出現的色譜分離技術目前已成為有機化學和生物化學中一項十分重要的分離與純化技術。隨著生物技術的迅猛發展, 特別是重組DNA 和雜交瘤技術的廣泛應用, 對于某些以生物活性大分子為主的重要生物制品和藥劑( 如標準蛋白質、干擾素、生長激素等) , 采用傳統的分離技術如超離心、沉淀、萃取、超濾等往往達不到所需的純度要求。人們在對高效的分離與純化技術的探索中, 將研究的重點轉向了色譜法, 進而促進了色譜分離技術的迅速發展, 使得色譜分離在理論上從線性色譜發展到非線性色譜, 在實踐中從分析規模發展到制備規模和生產規模。

        現代高效液相色譜柱具有以下特征:

(1) 柱長短、內徑大、呈圓餅狀( pancake) 。

        目前高效制備柱的柱長與常規分析柱相仿, 一般為20-50cm, 遠短于傳統柱長1m 甚至1m 以上的制備柱, 而內徑為10-1000mm, 因此可以在較大的流速下不致產生很高的柱壓降, 從而獲得高的產率。

(2) 填料顆粒小,分布窄。

        采用直徑為10-20μm的細顆粒, 孔徑及粒度分布均很窄的多孔球形或非球形填料替代傳統大顆粒(40-200μm) 、寬分布的無定形填料填充制備柱, 因而具有高得多的柱效, 通常每米的塔板數在20 000以上, 有的甚至可達到與分析柱相仿的柱效。

(3) 流速高。

         流動相的線速一般在5) 10cmPmin, 以便提高產率, 降低生產成本。




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